干貨分享 | 避坑，微生物培養(yǎng)的污染因素及預(yù)防方法，少走彎路

1、風(fēng)速與風(fēng)向

培養(yǎng)箱內(nèi)的風(fēng)速和風(fēng)向?qū)τ诒３譁囟鹊木恍砸约氨苊馕廴径挤浅Ｖ匾?。一般來說，適當(dāng)?shù)娘L(fēng)速和風(fēng)向可以幫助培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度保持均一，有利于微生物的正常生長。然而，當(dāng)風(fēng)速過大時，可能會導(dǎo)致培養(yǎng)基干裂，從而影響培養(yǎng)結(jié)果的準(zhǔn)確性。另外，藥典要求培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，這是因為經(jīng)過多次驗證發(fā)現(xiàn)，當(dāng)培養(yǎng)箱運行時的風(fēng)向與培養(yǎng)皿蓋的朝向不一致時，容易引入空氣中的灰塵、雜菌等，從而污染培養(yǎng)物。因此，在使用培養(yǎng)箱的過程中，需要注意風(fēng)速和風(fēng)向的控制，并盡量與培養(yǎng)皿蓋的朝向一致。

2、培養(yǎng)皿的密閉性

培養(yǎng)皿由平底和蓋組成，一些微生物實驗室常用的培養(yǎng)皿直徑為90mm，采用頂蓋封裝。然而，由于不同廠家制造的培養(yǎng)皿的成型工藝和參數(shù)不同，平底和蓋之間的間隙也存在差異。這些間隙雖然能夠滿足需氧型微生物對氧氣的需求，但也增加了污染的可能性。經(jīng)過實驗證實，在同樣的培養(yǎng)條件下，間隙大的培養(yǎng)皿比間隙小的培養(yǎng)皿更容易受到污染。此外，間隙的大小不同還會導(dǎo)致培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)不一致，從而影響培養(yǎng)結(jié)果數(shù)據(jù)的一致性。因此，在使用培養(yǎng)皿的過程中，需要選擇質(zhì)量可靠的培養(yǎng)皿，并注意平底和蓋之間的間隙情況。

3、培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度

微生物生長需要一定的濕度條件。濕度對微生物生長的影響是通過影響微生物細(xì)胞內(nèi)水分活度進(jìn)而影響其新陳代謝來實現(xiàn)的。不同微生物的生長對濕度有一定的要求，一般來說，細(xì)菌最為敏感，酵母和霉菌次之。降低濕度會使微生物的水分活度降低，從而減慢其生長速度。因此，在微生物培養(yǎng)的過程中，需要保持適宜的溫度和濕度，以有利于微生物的生長。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度的來源主要有培養(yǎng)基的水分散失、濕度自動調(diào)控系統(tǒng)以及培養(yǎng)箱所在的環(huán)境。因此，在使用培養(yǎng)箱的過程中，需要控制濕度，保持適宜的生長環(huán)境。

4、培養(yǎng)物溢灑

培養(yǎng)物溢灑是指含有生物危險物質(zhì)的液體或固體物質(zhì)意外與包裝材料分離的過程。一旦發(fā)生生物危害物品的溢出，尤其是含有病原微生物的培養(yǎng)物的溢出時，會導(dǎo)致微生物的生長和繁殖，從而引起培養(yǎng)箱的污染。為了預(yù)防交叉污染，當(dāng)發(fā)生培養(yǎng)物溢灑時，需要及時清理和消毒培養(yǎng)箱。應(yīng)該使用有效的消毒劑對培養(yǎng)箱的內(nèi)壁以及接觸溢出物品的材料進(jìn)行消毒或高壓滅菌。此外，如果溢灑物中含有破碎的玻璃等材料，不得直接用手取走或棄置，應(yīng)該使用硬紙板和鑷子等工具處理，并將處理物放置在安全的廢棄物容器中。最后，對清潔工具也需要進(jìn)行消毒處理，以確保衛(wèi)生安全。

5、自然環(huán)境污染

培養(yǎng)箱需要放置在潔凈、干燥、通風(fēng)良好的自然環(huán)境中。如果環(huán)境中空氣潔凈度不夠高，容易滋生細(xì)菌、真菌和病毒等微生物，并通過平底和蓋之間的間隙污染培養(yǎng)基，從而影響培養(yǎng)結(jié)果數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。因此，在使用培養(yǎng)箱的過程中，需要注意放置環(huán)境的衛(wèi)生和通風(fēng)狀況，盡量避免自然環(huán)境的污染。

綜上所述，微生物培養(yǎng)過程中存在著多種污染因素，這些因素可能會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響或?qū)е聦嶒灲Y(jié)果不準(zhǔn)確。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，需要在使用培養(yǎng)箱進(jìn)行微生物培養(yǎng)時，注意控制風(fēng)速和風(fēng)向、選擇合適的培養(yǎng)皿、控制濕度、避免培養(yǎng)物溢灑以及注意自然環(huán)境的衛(wèi)生狀況。只有這樣，我們才能夠獲得可靠且準(zhǔn)確的微生物培養(yǎng)結(jié)果。