成軟骨鑒定試劑盒(阿利新藍(lán)—核固紅染色法)
實驗原理
阿爾新藍(lán),是一種大分子共軛染料,類銅鈦花青染料,起初用于紡織纖維染色。這種陽離子染料與酸性基團(tuán)結(jié)合,形成不溶于水的復(fù)合物。阿爾新藍(lán)由含銅的酞菁環(huán)與四個異硫脲基通過硫醚鍵相連而成。該異硫脲基呈中度堿性,使阿爾新藍(lán)帶陽離子。阿爾新藍(lán)使碳水化合物著色的確切機(jī)制不明,普遍認(rèn)為是陽離子的異硫脲基通過靜電與組織內(nèi)的多聚陰離子相連。阿爾新藍(lán)不能沉淀糖原,但在pH2.5時,阿爾新藍(lán)可以與結(jié)締組織和軟骨中的蛋白多糖/透明質(zhì)酸以及上皮酸性黏蛋白發(fā)生反應(yīng)。從而用來鑒定成軟骨形成,染色結(jié)果會使得結(jié)締組織以及軟骨中的蛋白多糖及酸性粘蛋白呈鮮藍(lán)綠色,經(jīng)過核固紅染液染色后的細(xì)胞核呈紅色。
試劑盒組分
組分名稱 |
C02002-1 |
C02002-2 |
阿爾新藍(lán)染色液 |
10ml |
20 |
核固紅染色液 |
10ml |
20 |
3%醋酸溶液 |
15ml*2 |
30ml*2 |
操作步驟
1. 石蠟切片脫蠟至蒸餾水洗數(shù)次;
2. 用3%醋酸水溶液洗滌;
3. 阿爾新藍(lán)染液染10-30分鐘;
4. 3%醋酸水溶液洗滌,吸水紙吸干;
5. 核固紅染色液染細(xì)胞核2-3分鐘
6. 水洗,常規(guī)脫水,透明,中性樹膠封固。
7. 4℃避光保存12個月。
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