溫和型干細(xì)胞消化酶

產(chǎn)品名稱(chēng)：溫和型干細(xì)胞消化酶                產(chǎn)品規(guī)格：100ml
產(chǎn)品貨號(hào)：JXS0501                                     儲(chǔ)存條件：2-8℃保存，20℃長(zhǎng)期保存

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

        溫和型干細(xì)胞消化酶專(zhuān)門(mén)用于干細(xì)胞的消化，包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，
胚胎干細(xì)胞（ES）等。傳統(tǒng)胰蛋白酶只要接觸到細(xì)胞，就持續(xù)不斷的切割蛋白的精氨酸及賴(lài)氨
酸C末端形成的肽鍵。溫和型干細(xì)胞消化酶與胰蛋白酶的作用機(jī)理不同，它只消化細(xì)胞與細(xì)胞之
間，以及細(xì)胞與培養(yǎng)瓶之間的細(xì)胞外基質(zhì)，而不損傷細(xì)胞膜的完整性， 因此消化作用溫和，對(duì)
干細(xì)胞的損害極小。即使消化時(shí)間超過(guò)10分鐘，細(xì)胞活率仍可保持90%以上，對(duì)干細(xì)胞的后續(xù)
傳代也幾乎沒(méi)有影響，減少了對(duì)操作人員技能的要求。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1、即用型 ，無(wú)需配制，4℃保存。
2、操作便利，無(wú)需消化終止，細(xì)胞存活率高。
3、成分明確，純?nèi)斯ず铣?，無(wú)任何動(dòng)物源成分。
4、安全性高，更適合臨床研究及藥物申報(bào)用途。
5、避免了消化過(guò)度，使大規(guī)模干細(xì)胞生產(chǎn)成為可能。

細(xì)胞消化步驟

一、細(xì)胞消化前準(zhǔn)備(以T25瓶為例)

1、觀察貼壁細(xì)胞長(zhǎng)至80%-90%左右，棄去細(xì)胞培養(yǎng)液。

2、用5ml無(wú)鈣鎂的HBSS溶液或PBS清洗貼壁細(xì)胞，棄去清洗液。

二、細(xì)胞消化過(guò)程(以T25瓶為例)

1、向T25瓶中加入1ml干細(xì)胞溫和消化酶，置于37度培養(yǎng)箱中消化細(xì)胞。

2、約3min后，細(xì)胞變圓，立即加入5mLPBS溶液進(jìn)行稀釋。

3、將上述6mL含細(xì)胞液體轉(zhuǎn)移至離心管中，置于離心機(jī)中離心1000rpm，3min

4、去除離心管中的上清液。

5、根據(jù)接下來(lái)的應(yīng)用目的加入干細(xì)胞培養(yǎng)基(細(xì)胞傳代用途)或細(xì)胞凍存液(細(xì)胞凍存用途)。

常見(jiàn)問(wèn)題

Q： 為什么要開(kāi)發(fā)干細(xì)胞溫和消化酶產(chǎn)品？
A：消化過(guò)度與生長(zhǎng)過(guò)密是干細(xì)胞培養(yǎng)失敗的前兩大原因。在生產(chǎn)級(jí)的大規(guī)模培養(yǎng)中，消化過(guò)度更是
        一個(gè)難以控制的工藝難題。溫和消化酶就是為了解決這個(gè)問(wèn)題而設(shè)計(jì)的：在該產(chǎn)品的消化時(shí)間挑
       戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)中，浸潤(rùn)在溫和酶中長(zhǎng)達(dá)30min的干細(xì)胞，細(xì)胞活率均能保持在90%以上，表型正常，且后
        續(xù)傳代正常

Q：干細(xì)胞溫和消化酶的保存溫度條件是2-8℃。我如果-20℃保存，會(huì)不會(huì)更好？
A：該酶蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，在2-8℃條件下也可穩(wěn)定保存。若放置-20℃環(huán)境，應(yīng)避免反復(fù)凍融問(wèn)題，否則
       會(huì)導(dǎo)致該酶活性下降，細(xì)胞消化時(shí)間延長(zhǎng)。 建議分裝后置于-20℃長(zhǎng)期保存。

Q：用無(wú)血清培養(yǎng)基及含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)的干細(xì)胞，在使用溫和酶消化方面有什么異同？
A：相同之處是：無(wú)論使用何種培養(yǎng)基，在消化前均需要使用無(wú)鈣鎂離子的緩沖液沖洗細(xì)胞。
       不同之處：如果使用無(wú)血清培養(yǎng)基，清洗一次即可。如果使用血清培養(yǎng)基，應(yīng)當(dāng)連續(xù)清洗細(xì)胞三
        次，以確保無(wú)血清殘留，否則消化時(shí)間會(huì)變長(zhǎng)。

Q：在消化時(shí)間方面，溫和消化酶與傳統(tǒng)胰酶有什么差別？
A：溫和型干細(xì)胞消化酶在消化時(shí)間上要稍長(zhǎng)一些。一般消化干細(xì)胞需要2-5min左右的時(shí)間。可根據(jù)
       細(xì)胞狀態(tài)及種類(lèi)適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間，且不會(huì)對(duì)細(xì)胞活性產(chǎn)生影響。傳統(tǒng)胰酶要嚴(yán)格控制消化時(shí)間

Q：溫和消化酶消化細(xì)胞后，需要添加培養(yǎng)基或胰酶抑制劑終止消化過(guò)程嗎？
A：不需要。細(xì)胞變圓后添加細(xì)胞培養(yǎng)上清或PBS溶液稀釋即可。

Q：添加完細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋后，可不離心去除消化酶嗎？
A：不可以。殘留的消化酶會(huì)影響后續(xù)干細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程，會(huì)導(dǎo)致干細(xì)胞的形態(tài)變化。

使用注意事項(xiàng)
1、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套進(jìn)行操作
2、該產(chǎn)品僅用作科研檢測(cè)，不得用于臨床應(yīng)用及相關(guān)操作